如何使用ph计算乳酸菌含量，求实验设计分离乳酸菌乳酸菌发酵豆浆

乳酸菌本身的pH值约为6。但值得注意的是，这里所说的pH值是指乳酸菌在特定环境下，如发酵液或食品中的酸碱度表现，而非乳酸菌细胞内部的pH值。以下是对乳酸菌pH值及相关内容的进一步解释：一、乳酸菌的生长环境pH值乳酸菌是一类能在特定pH值范围内生长的细菌。适宜乳酸菌生长的pH值通常为5.4以下。

乳杆菌通常使用MRS培养基，MRS培养基的配方包括：蛋白胨10.0克、牛肉浸取物10.0克、酵母提取液5.0克、葡萄糖20.0克、乙酸钠5.0克、柠檬酸氢二胺2.0克、吐温-801.0ml、磷酸氢二钾2.0克、七水硫酸镁0.2克、七水硫酸锰0.05克，加蒸馏水1.0升。在使用前，需用高压锅在121℃灭菌15分钟，

菌落总数采用逐级稀释法计数，pH值用pHS-2C酸度计测定，乳酸定性及含量测定依据食品检验技术进行。乳酸菌的鉴定方法包括：用光学显微镜、放大镜进行形态特征鉴定，生理生化特征鉴定包括产乳酸定性试验、过氧化氢酶反应、明胶水解反应、硫化氢反应、乳酸菌发酵营养型试验、耐盐、酸、温度试验。乳酸菌的保存采用

1 2 方法，PH计（杭州诺丁仪器设备）1 2 1 乳酸菌的分离纯化取泡菜汁、酸奶、西红柿表面洗液进行梯度稀释，分别用倾注法、涂布法和划线法在BCP和MRS培养基平板上进行菌种分离。挑取在BCP平板上有透明目的菌落，在 MRS平扳上有溶钙圈的菌落，反复纯化至纯种，挑菌至脱脂牛奶试管中保存 1．2 2 乳

如何使用ph计算乳酸菌含量

检测内容：确定酸奶中乳酸菌的数量和种类，以确保其益生菌活性。检测方法：采用微生物培养法或荧光定量PCR等方法进行检测。总固体：检测内容：测量酸奶中所有非挥发性物质的总含量，包括蛋白质、脂肪、糖分和矿物质等。检测方法：通过干燥法或重量法测定。脂肪：检测内容：测定酸奶中的脂肪含量，以评估其

用最基本的方法，虽然，比较粗略，但是很方便。用吸管，吸一滴（刻度5毫升）放入100毫升纯净水稀释，这样重复两次。最后取一滴稀释液，放到载波片上，用盖波片盖住。用显微镜观察，清点数量，（观看形状，因为有杂菌）最后，计算就很简单了

平板计数法：与乳酸菌的检测类似，将发酵饲料样品稀释后涂布在含有适宜培养基（如YPD培养基）的平板上，然后在适宜的温度下（一般为25-30℃）培养一定时间（如72小时）。培养结束后，统计平板上的菌落数，计算出样品中的酵母菌活菌数。发酵法：利用酵母菌的发酵特性，通过测定发酵过程中产生的二氧化碳量

测定方法菌落总数采用逐级稀释法来计数；pH值用pHS一2C酸度计测定；乳酸定性及含量测定依据食品检验技术 1I．2．1乳酸菌的分离与筛选的试验程序自然发酵酸奶---稀释---培养---挑起单菌落染色、镜检一挑选革兰氏阳性球菌单菌落一Ⅲ号培养基一挑选溶钙圈大的球菌反复在Ⅲ号培养基上几次纯化筛选一

如何测定乳酸菌的含量?

乳酸菌发酵pH降不下来的核心原因是菌群活性不足或环境条件不适宜，可通过调整温度、优化菌种、改善底物等综合措施解决。一、排查关键影响因素1. 菌种活性问题：确认使用菌种是否过期或保存不当。失效菌种代谢能力下降后，产酸效率可降低40%-70%。2. 温度异常波动：不同菌株适宜温度差异明显，如保加利亚乳

二、“微生态护肤”理念的核心作用皮肤微生态平衡：皮肤表面存在大量有益菌群（如乳酸菌），它们构成微生态系统，维持屏障健康。冬季环境变化易破坏菌群平衡，导致屏障功能下降。乳酸菌发酵溶胞产物的功能：保持面部微生态平衡，增加常驻菌群数量；修复受损屏障，促进老化物质脱落；淡化红血丝，提升皮肤健康度。

将制好的热豆浆用滤网过滤到已经消毒的容器中，盖上盖子等待豆浆温度下降至适宜乳酸菌发酵的温度。五、加入发酵粉并发酵将乳酸菌粉倒入豆浆中，充分搅拌均匀。如果豆浆较浓稠，不易和菌粉互溶，可以先用少量豆浆或洁净水化开乳酸菌粉，再掺入豆浆中。将装有豆浆和乳酸菌粉的容器放入酸奶机中，按照酸

准备绿豆浆：将绿豆浸泡至可捻去皮后捞出，加入八倍的水用食品加工机磨成细浆。沉淀与发酵：将磨好的绿豆浆倒入大容器内沉淀，等待数天让其自然发酵。在温度适宜且PH值在5.56.0的环境下，绿豆浆中的乳酸菌会开始作用，使豆浆逐渐变酸。分离酸浆：发酵后，容器中的物质会分为三层：沉入缸底的是淀

③分离直接用接种环蘸取10-3,10-4、两个稀释度的试管中原液，在BCG牛乳培养基琼脂平板上划线分离，每稀释度做两个平皿。置40℃培养箱中培养48h。如出现圆形稍扁平的黄色菌落及周围培养基变为黄色者初步定为乳酸菌。

求实验设计分离乳酸菌乳酸菌发酵豆浆

一、扩增曲线和熔解曲线的基本概念扩增曲线：随着PCR反应的进行，扩增产物不断积累，荧光信号强度不断增加。仪器每经过一次循环，收集一次荧光信号，通过荧光强度的变化监测扩增产物量的变化，得到的扩增曲线图。熔解曲线：反应随温度升高，双链扩增产物逐渐解链，荧光信号逐渐减小的曲线。熔解曲线的特征峰对应

脱色液仪器：Ni-NTA超声破碎仪层析柱浓缩管四、步骤构建原核表达质粒：目的基因PCR，载体酶切，连接，转化，挑单克隆送测序。将构建成功的质粒转化到BL21（DE3）中，37℃培养过夜，挑单克隆小摇过夜。小诱导摸索最佳诱导条件：将摇过夜的菌液1:1000接种到3mL LB中，37℃摇4-5h至菌液OD600=0.6-

PCR技术的常规实验流程步骤主要包括以下三点：变性：目的：使模板DNA双链解旋为单链，以便与引物结合。条件：通常在95℃高温下进行，第一轮循环中的变性时间通常为10分钟，其他循环中30秒即可。特殊情况：当模板G+C含量超过55%时，可能需要提高变性温度，并使用更耐高温的DNA聚合酶。退火：目的：使引物

数字PCR是一种核酸分子绝对定量技术，基于单分子PCR方法来进行计数的核酸定量。原理：将大量稀释后的核酸溶液分散至芯片的微反应器或微滴中，每个反应器的核酸模板数少于或等于1个。经过PCR循环后，有一个核酸分子模板的反应器就会给出荧光信号。根据相对比例和反应器的体积，推算出原始溶液的核酸浓度。应用

1. 普通PCR：用于扩增靶基因，通过琼脂糖凝胶电泳进行定性分析。2. 实时荧光定量PCR（qPCR）：在PCR过程中实时监测扩增产物量的变化，通过标准曲线和CT值进行定量分析。qPCR分为荧光染料法和荧光探针法两种。- 荧光染料法（SYBR Green）：适用于所有双链DNA，但可能产生假阳性结果。- 荧光探针法（TaqMan

乳酸菌菌液 PCR 主要用于确认菌落是否含有目标质粒，以下是详细步骤：从MRS平板上分离纯化菌种，通过多次划线培养直至得到单一纯菌。培养菌种后，取单菌落悬浮于MRS液体培养基中进行扩增前的培养。配置PCR体系，包括 Taq Mix、引物、菌液模板，其中阴性对照需使用灭菌ddH2O。进行PCR反应，设置标准的反应程序

干货分享 | 乳酸菌菌液 PCR

我还以为乳酸菌的特长是分解乳酸，竟然还能发酵豆浆
我也在做这个，下面是我整理的，时间关系只能这样了，可以看看。都要求无菌操作菌种的分离取lmL卤汁以10倍递增稀释方法（一份酸奶，九份无菌水，再取一份第一只管中溶液，加九份无菌水，依次类推），将其稀释至1/10～10的-10次幂（我打不上去），然后从不同浓度稀释液中分别取lmL倾注在平皿中，再倒入培养基相混合，待培养基凝固后倒置于30~C恒温下培养48h。挑取长势良好的单个茵落划线分纯，直至纯化(茵落单个大小一致，革兰氏染色镜检，茵体一致)。结果分离得到3株不同菌株，分别编号为菌株1、菌株2、菌株3。再分别转移到试管斜面上进行保存。分离用培养基：牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，蒸馏水1 000 mL，琼脂20g，pH7．0—7．2 ；保存用斜面培养基：酵母膏1％，碳酸钙2％，葡萄糖1％，琼脂2％，pH 7．0。培养条件将分离出的菌株1、菌株2、菌株3分别接种在上述4种不同的培养基上，在30。【=恒温条件下培养48h后观察并测定其培养结果。测定方法菌落总数采用逐级稀释法来计数；pH值用pHS一2C酸度计测定；乳酸定性及含量测定依据食品检验技术 1I．2．1乳酸菌的分离与筛选的试验程序自然发酵酸奶---稀释---培养---挑起单菌落染色、镜检一挑选革兰氏阳性球菌单菌落一Ⅲ号培养基一挑选溶钙圈大的球菌反复在Ⅲ号培养基上几次纯化筛选一单菌落优良菌株一试管穿刺低温保存。 1．2 1．2 乳酸菌的鉴定用光学显微镜、放大镜进行乳酸菌的形态特征鉴定。生理生化特征鉴定：产乳酸定性试验——乳酸纸层析法0- 、过氧化氢酶(接触酶)反应�6�8、明胶水解反应、硫化氢反应、乳酸菌发酵营养型试验0 、耐盐、酸、温度试验。 1．2．I．3 乳酸菌的保存�6�8 采用定期移植低温保藏法。培养基配方：葡萄糖1％、蛋白胨0 2％、 l(}l2PQ|0．2％、琼脂20％、pH值7 0，分装试管，121。c灭菌30min。将使用对数生长期后期的细胞进行穿刺培养，然后密封存于冰箱玲藏室内(5qc左右)，2个月移植1次。 1．2．2 分离乳酸菌的生理特点试验 1 2 2．1 最适生长温度的测定OD值以同温下不接种培养基作对照，定期取出接种培养基在721分光光度计上，用最大吸收光波长 =6001RIifl测定。 1．2．2．2 生长周期的测定oD值(方法同上)；pH值：PHB一4pH计；可滴定酸(以乳酸计)：吸取ImL菌液加入9Ⅱ1L蒸馏水，加入1～2滴酚酞，用0．1NNaOH滴定。 1．2 2．3 最适pH值的测试、最适盐浓度的测试。供试样品及培养基分离用样品：酸奶、酸奶及西红柿均为市售分离用培养基：①BCP培养基：酵母膏2 5g，蛋白胨5g，葡萄糖5g，溴甲酚紫0 04g，琼脂15g，蒸槽水lO00ml，pH7 0；②MRS培养基见文献。菌种保藏用培养基：脱脂乳培养基：新鲜牛乳离心去掉上层乳脂，下层奶液分装试管，105℃ 灭菌20mln。菌利鉴定用培养基见文献 6。 1 2 方法 1 2 1 乳酸菌的分离纯化取泡菜汁、酸奶、西红柿表面洗液进行梯度稀释，分别用倾注法、涂布法和划线法在BCP和MRS培养基平板上进行菌种分离。挑取在BCP平板上有透明目的菌落，在 MRS平扳上有溶钙圈的菌落，反复纯化至纯种，挑菌至脱脂牛奶试管中保存 1．2 2 乳酸菌复筛对初筛菌株进行革兰氏染色，保留革兰氏阳性菌株．并对其所产乳酸能力进行定性、定量分析，筛选出产酸高的菌株保存，再把产酸高的菌株经萝l、汁发酵】，进一步选择产酸高、_l】味纯正的菌株保存鉴定 1 2 3 乳酸定性测定果用纸层析法。溶剂系统为乙醇：浓氨水：水=80：5：15，显色剂为0 04％的溴甲酚紫酒精溶液。层析时将乳酸、柠檬酸配成1％的标准溶液，两种标准溶液及乳酸发酵液均点样3 ．上行层析，显色与标准样比较 1．2 4 乳酸的定量测定采用气相色谱法，利用苄酯化法制备乳酸衍生物，将待测乳酸菌株在产酸培养基内37"C培养3d，离心。取上清液剃备衍生物，气相色谱分析含量。气相色谱工作条件为： EGS色谱柱，柱温160'C，气化温度180'17．，检测器温度l70"C，载气为N，。 1．2 5 菌种鉴定根据《简明第八版伯杰细菌鉴定手册》和《一般细菌常用鉴定手册》[6 对复筛出的菌株的形态、生理生化、碳源利用等方面进行系统鉴定，并提取乳酸菌株DNA，采用熔链温度
菌种的分离取lmL卤汁以10倍递增稀释方法（一份酸奶，九份无菌水，再取一份第一只管中溶液，加九份无菌水，依次类推），将其稀释至1/10～10的-10次幂（我打不上去），然后从不同浓度稀释液中分别取lmL倾注在平皿中，再倒入培养基相混合，待培养基凝固后倒置于30~C恒温下培养48h。挑取长势良好的单个茵落划线分纯，直至纯化(茵落单个大小一致，革兰氏染色镜检，茵体一致)。结果分离得到3株不同菌株，分别编号为菌株1、菌株2、菌株3。再分别转移到试管斜面上进行保存。分离用培养基：牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，蒸馏水1 000 mL，琼脂20g，pH7．0—7．2 ；保存用斜面培养基：酵母膏1％，碳酸钙2％，葡萄糖1％，琼脂2％，pH 7．0。培养条件将分离出的菌株1、菌株2、菌株3分别接种在上述4种不同的培养基上，在30。【=恒温条件下培养48h后观察并测定其培养结果。测定方法菌落总数采用逐级稀释法来计数；pH值用pHS一2C酸度计测定；乳酸定性及含量测定依据食品检验技术 1I．2．1乳酸菌的分离与筛选的试验程序自然发酵酸奶---稀释---培养---挑起单菌落染色、镜检一挑选革兰氏阳性球菌单菌落一Ⅲ号培养基一挑选溶钙圈大的球菌反复在Ⅲ号培养基上几次纯化筛选一单菌落优良菌株一试管穿刺低温保存。 1．2 1．2 乳酸菌的鉴定用光学显微镜、放大镜进行乳酸菌的形态特征鉴定。生理生化特征鉴定：产乳酸定性试验——乳酸纸层析法0- 、过氧化氢酶(接触酶)反应�6�8、明胶水解反应、硫化氢反应、乳酸菌发酵营养型试验0 、耐盐、酸、温度试验。 1．2．I．3 乳酸菌的保存�6�8 采用定期移植低温保藏法。培养基配方：葡萄糖1％、蛋白胨0 2％、 l(}l2PQ|0．2％、琼脂20％、pH值7 0，分装试管，121。c灭菌30min。将使用对数生长期后期的细胞进行穿刺培养，然后密封存于冰箱玲藏室内(5qc左右)，2个月移植1次。 1．2．2 分离乳酸菌的生理特点试验 1 2 2．1 最适生长温度的测定OD值以同温下不接种培养基作对照，定期取出接种培养基在721分光光度计上，用最大吸收光波长 =6001RIifl测定。 1．2．2．2 生长周期的测定oD值(方法同上)；pH值：PHB一4pH计；可滴定酸(以乳酸计)：吸取ImL菌液加入9Ⅱ1L蒸馏水，加入1～2滴酚酞，用0．1NNaOH滴定。 1．2 2．3 最适pH值的测试、最适盐浓度的测试。供试样品及培养基分离用样品：酸奶、酸奶及西红柿均为市售分离用培养基：①BCP培养基：酵母膏2 5g，蛋白胨5g，葡萄糖5g，溴甲酚紫0 04g，琼脂15g，蒸槽水lO00ml，pH7 0；②MRS培养基见文献。菌种保藏用培养基：脱脂乳培养基：新鲜牛乳离心去掉上层乳脂，下层奶液分装试管，105℃ 灭菌20mln。菌利鉴定用培养基见文献 6。 1 2 方法 1 2 1 乳酸菌的分离纯化取泡菜汁、酸奶、西红柿表面洗液进行梯度稀释，分别用倾注法、涂布法和划线法在BCP和MRS培养基平板上进行菌种分离。挑取在BCP平板上有透明目的菌落，在 MRS平扳上有溶钙圈的菌落，反复纯化至纯种，挑菌至脱脂牛奶试管中保存 1．2 2 乳酸菌复筛对初筛菌株进行革兰氏染色，保留革兰氏阳性菌株．并对其所产乳酸能力进行定性、定量分析，筛选出产酸高的菌株保存，再把产酸高的菌株经萝l、汁发酵】，进一步选择产酸高、_l】味纯正的菌株保存鉴定 1 2 3 乳酸定性测定果用纸层析法。溶剂系统为乙醇：浓氨水：水=80：5：15，显色剂为0 04％的溴甲酚紫酒精溶液。层析时将乳酸、柠檬酸配成1％的标准溶液，两种标准溶液及乳酸发酵液均点样3 ．上行层析，显色与标准样比较 1．2 4 乳酸的定量测定采用气相色谱法，利用苄酯化法制备乳酸衍生物，将待测乳酸菌株在产酸培养基内37"C培养3d，离心。取上清液剃备衍生物，气相色谱分析含量。气相色谱工作条件为： EGS色谱柱，柱温160'C，气化温度180'17．，检测器温度l70"C，载气为N，。 1．2 5 菌种鉴定根据《简明第八版伯杰细菌鉴定手册》和《一般细菌常用鉴定手册》[6 对复筛出的菌株的形态、生理生化、碳源利用等方面进行系统鉴定，并提取乳酸菌株DNA，采用熔链温度 .
现在国家标准是1x10的六次方，但是我最近查资料发现国际标准是咱们国家标准的10倍，也就是1x10七次方，我目前也在查询国际标准查询方式，国家标准GB 16321-2003文件，你可以查一下
PH计时测定溶液的酸碱度，溶液中氢离子的浓度的，乳酸菌含量可能是测不出来的，除非它和氢离子浓度有一定的关系
最适生长温度37℃，20℃以下不生长，耐热性差。最适生长PH5.5~6.0，耐酸性强，能在其他乳酸菌不能生长的酸性环境中生长繁殖.